肝糖原的提取.鉴定与定量肝糖原的提取与鉴定.docx
1、肝糖原的提取.鉴定与定量肝糖原的提取与鉴定生物化学实验报告姓名:学号:3130010071专业年级:2013级临床医学组别:第2实验室生物化学与分子生物学实验教学中心实验名称肝糖原的提取、鉴定、分离实验日期2014-12-25合作者评分陈海玲教师签名实验地点第2实验室指导老师朱利娜批改日期一、实验目的1、掌握组织样品的制备方法,了解其注意事项。2、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项,掌握其操作方法。3、正确操作使用刻度吸管和可调微量取液器。4、熟练运用溶液混匀的各种方法。5、正确掌握溶液转移的操作。6、正确操作使用分光光度计。二、实验原理肝糖原的提取糖原储存
2、于细胞内,采用淹没匀浆等方法可使细胞破碎,低浓度的三氯醋酸能使蛋白质变性,破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质,而糖原仍稳定地保存于上清液中,从而使糖原与蛋白质等其他成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水,故先用95%乙醇将绿叶中糖原沉淀,再溶于热水中。糖原的鉴定糖原水溶液呈乳样光泽,遇碘呈红棕色。这是糖原中葡萄糖长链形成的螺旋中,依靠分子间引力吸附碘分子后呈现的颜色。糖原还可被酸水解为葡萄糖,利用呈色反应和葡萄糖的还原性,可判定肝组织中糖原的的存在。cuso4+2naoh=na2so4+cu(oh)2cu(oh)2+c6h12o6=2cuoh+氧化型葡萄糖+h2o2cuoh=h20+cu2红色)cu(oh)2=h2黑
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